货号: YG1002
规格: 2×16 T / 6×16 T
储存条件: Proteinase K,2 ~ 8℃保存和运输;其他组分,15 ~ 25℃保存,室温运输。
产品说明:
本试剂盒用于从血液中分离纯化高质量的基因组DNA。使用高亲和力硅基磁珠,在高盐缓冲液的作用下,通过氢键和静电吸附核酸,然后经过漂洗去除多余的蛋白质和盐;进一步在低盐洗脱液或无核酸酶的去离子水的作用下,从磁珠释放核酸,达到快速分离纯化核酸的目的。本试剂盒匹配的全自动核酸提取仪,利用磁珠吸附原理,通过特制的磁棒吸附、转移和释放磁珠,实现磁珠/核酸的转移,自动、快速完成核酸的提取和纯化。本试剂盒分离的DNA可适用于多种下游应用,包括PCR、Real-time PCR、文库构建和芯片分析等。
试剂盒组成
|
包装(2×16T)
|
包装(6×16T)
|
DNA Reagents (Prepackaged for YG1002)
|
2×16 T
|
6×16 T
|
Proteinase K
|
2 × 750 μl
|
5 × 1 ml
|
适用仪器:
本试剂盒可适配市面上大多数全自动核酸提取仪,如:Thermo Fisher KingFisher Apex、QIAGEN QIAcube Connect、Roche MagNA Pure 96 System、TIANLONG #NP968-C、Vazyme #VNP-32P、zybio #EXM 9600等。
适用样本范围:
血液样本:50 - 200 μl新鲜或冻存的抗凝全血。
注意事项:
1. 血液样本处理过程需在生物安全柜中进行;
2. 使用全自动核酸提取仪前后,需对其进行无菌处理;
3. 本试剂盒撕去铝箔封口膜后,需立即使用,以防试剂挥发影响提取效果;
4. 血液样本应尽量避免反复冻融或室温长期保存,否则会导致提取产量和纯度的下降;
5. 血液样本保存:可立即进行提取,也可2 ~ 8℃保存待测,保存期不超过24 h,长期保存需置于-80℃;
6. 纯度测定:如用ddH2O标定,会导致OD 260/230比值偏低,因为pH值和离子的存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低;
7. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
实验步骤:
1. 预封装试剂准备
从试剂盒中取出预封装试剂,颠倒混匀数次使磁珠重悬,轻甩孔板,使试剂及磁珠位于孔板底部,使用前请确认孔位方向并小心撕去铝箔封口膜。
注意:撕封口膜时避免振动,防止液体溅出。
2. 自动化仪器提取步骤
a) 向96深孔板的第1列和第7列孔中均依次加入200 μl血液样本和40 μl Proteinase K。
b) 将96深孔板按正确方向(缺口朝向左上角)置于核酸提取仪中,安装磁棒套,并确保其插入至底部。
c) 按以下编辑程序(或选择对应预设程序),进行自动化提取。
步骤
|
槽位
|
名称
|
混合时间
(min)
|
磁吸时间
(sec)
|
等待时间
(min)
|
体积
(μl)
|
混合速度
|
温度
(℃)
|
混合位置
|
混合幅度
|
磁吸位置
|
磁吸速度
|
1
|
2
|
移磁珠
|
0.5
|
30
|
0
|
700
|
10
|
-
|
10%
|
80%
|
0%
|
5
|
2
|
1
|
裂解
|
10
|
60
|
0
|
790
|
10
|
80
|
10%
|
100%
|
0%
|
5
|
3
|
2
|
漂洗1
|
3
|
60
|
0
|
700
|
10
|
-
|
10%
|
100%
|
0%
|
10
|
4
|
3
|
漂洗2
|
3
|
30
|
0
|
700
|
4
|
-
|
10%
|
100%
|
0%
|
10
|
5
|
4
|
漂洗3
|
3
|
30
|
0
|
700
|
4
|
-
|
10%
|
100%
|
0%
|
10
|
6
|
5
|
漂洗4
|
2
|
30
|
1
|
700
|
4
|
-
|
10%
|
100%
|
0%
|
10
|
7
|
6
|
洗脱
|
13
|
180
|
0
|
100
|
10
|
65
|
10%
|
100%
|
0%
|
10
|
8
|
2
|
弃磁珠
|
0.1
|
0
|
0
|
700
|
8
|
-
|
10%
|
80%
|
0%
|
5
|
其他设置(选项栏设置):升温设置(升温和动作同时开始)
吸磁设置(3段吸磁)
|
d) 自动化程序结束后,将第6列和第12列孔中的洗脱液转移至干净的无核酸酶的离心管中;洗脱产物可直接用于下游实验或于-20℃保存。