细胞说明书
|
细胞名称:
|
Hep G2 人肝癌细胞
|
|
产品货号:
|
CL10114P
|
规格:
|
T25瓶
|
|
生长特性:
|
上皮细胞样,贴壁生长
|
简介:
|
Hep G2是来自15岁男性白人的组织;模式染色体数为55;在免疫抑制小鼠中不致瘤。
|
|
完全培养基
|
DMEM + 10%FBS + 1%P/S
|
|
培养条件:
|
37℃、空气,95%;二氧化碳,5%
|
|
冻存条件:
|
90%FBS+10%DMSO
|
仅供科研使用,不可用于临床诊断和治疗!
细胞复苏
取出细胞冻存管,放进37℃水浴锅中,并用夹子夹着晃动冻存管,使之快速融化复温,加适量培养基转移至离心管中离心。离心转速以离心力150 g (约 1000 rpm)左右,3~5min。弃上清,用新鲜培养基重悬细胞,转移至培养皿或培养瓶中,轻轻吹匀,放培养箱中培养。
细胞传代
1)如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。首次传代,建议1:2传代。
2)弃去培养上清,用PBS 润洗细胞 1-2 次。
3)加入1~2ml 0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿底细胞,盖好放入培养箱消化(消化时间10 s~2 min不等,不同细胞消化时间不同,以细胞收缩变圆为准,第一次消化,建议镜下实时观察消化,以确定实验室对该细胞消化的最优条件,避免消化过度),加入新鲜的完全培养基终止消化;收集细胞悬液至15ml无菌离心管中,1000 rpm 离心 5 min ,弃去上清液,补加 1-2 mL 培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按 1:2 比例分到新的培养皿或培养瓶中,补足培养基,置于培养箱中培养。
其他注意事项:
1)收到细胞后,请首先检查培养瓶是否破损或漏液,培养液是否混浊,如有漏液及培养液混浊情况请立即拍照,并及时和我们联系。
2)仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致。
3)75%酒精消毒瓶身后放培养箱中静置4~6h后,在显微镜下确认细胞状态并拍照100倍和200倍的照片留存,若有贴壁细胞脱落,可离心收集后用新鲜完全培养基重悬,吹散,补加适量培养基接种到新培养瓶即可。
4)如您收到细胞7天内没有反馈相关问题,出现的细胞问题将不提供免费重发服务。
注:发货用培养基可用做缓冲,之后逐步更换为新鲜完全培养基。