细胞说明书
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细胞名称：
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MC3T3-E1 小鼠胚胎成骨细胞
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产品货号：
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CL1004
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规格：
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T25瓶
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生长特性：
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成纤维细胞样，贴壁生长
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传代比例：
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1:2-1:3
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完全培养基
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90% α MEM, 10%FBS, 1%双抗
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培养条件：
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37℃、95%空气+5%CO2
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冻存条件：
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90%FBS+10%DMSO
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仅供科研使用，不可用于临床诊断和治疗！
细胞复苏
取出细胞冻存管，放进37℃水浴锅中，并用夹子夹着晃动冻存管，使之快速融化复温，加适量培养基转移至离心管中离心。离心转速以离心力150 g (约 1000 rpm)左右，3~5min。弃上清，用新鲜培养基重悬细胞，转移至培养皿或培养瓶中，轻轻吹匀，放培养箱中培养。
细胞传代
1）如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。首次传代，建议1:2传代。
2）弃去培养上清，用PBS 润洗细胞 1-2 次。
3）加入1~2ml 0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿底细胞，盖好放入培养箱消化2min（具体时间根据镜下形态判断）。显微镜下观察细胞，细胞回缩，即将脱壁而未脱壁时（可用枪轻轻吹打确认细胞是否脱壁），加入新 鲜的完全培养基终止消化；收集细胞悬液至15ml无菌离心管中，1000 rpm 离心 5 min ，弃去上清液，补加 1-2 mL 培养液后吹匀。
4）将细胞悬液按 1:2 比例分到新的培养皿或培养瓶中，补足培养基，置于培养箱中培养。
其他注意事项：
1）收到细胞后，请首先检查培养瓶是否破损或漏液，培养液是否混浊，如有漏液及培养液混浊情况请立即拍照，并及时和我们联系。
2）仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致。
3）75%酒精消毒瓶身后放培养箱中静置4~6h后，在显微镜下确认细胞状态并拍照100倍和200倍的照片留存，若有贴壁细胞脱落，可离心收集后用新鲜完全培养基重悬，吹散，补加适量培养基接种到新培养瓶即可。
4）如您收到细胞7天内没有反馈相关问题，出现的细胞问题将不提供免费重发服务。
注：发货用培养基可用做缓冲，之后逐步更换为新鲜完全培养基。
